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青岛市妇女儿童医院生殖中心
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胚胎冷冻保存技术

    2016年元月,五中全会公报指出:促进人口均衡发展。坚持计划生育的基本国策,完善人口发展战略。全面实施一对夫妇可生育两个孩子政策。标志着我国全面进入“二胎时代”。但由于二胎准父母一部分年龄已达超过最佳生育年龄,卵巢储备降低,造成了符合条件,却陷入了“巧妇无米”的困境。高龄生育的难题是目前生殖医学所面临的主要障碍。而对育龄妇女进行生育力保存和生育力保健指导是生殖中心的主要工作和诊治范围之一。根据目前的研究报道:胚胎冻存是目前唯一成熟的保存生育力的技术手段。相较于配子冷冻,胚胎冷冻的复苏率可达99%,复苏率更高,且可进行长时间的保存。

    冷冻胚胎的技术是将通过试管培育技术得到的胚胎,存置于零下196℃的液氮环境中,得到长时间保存。目前常用的胚胎冷冻方法有两种:

    1、 程序冷冻法(也叫慢速冷冻法),是将胚胎放入含有一定浓度冷冻保护剂的冷冻液中处理后,慢速降温(0.2-2°C/min)至一个较低的温度(-35-80°C)。在降温过程中胚胎会继续脱水。此方法采用较低浓度的冷冻保护剂,对胚胎毒性损害小,解冻后存活率较高。但其操作繁琐,降温速度慢,所需时间较长,需要特殊的冷冻装置(程序冷冻仪)。在不具备实验室条件的场所不能使用此方法进行冷冻。目前国内外均较少使用。

    2、 玻璃化冷冻法,是近年来发展起来的一种新的胚胎冷冻方法。基本原理是将高浓度的冷冻保护剂在超低温环境下凝固,形成不规则的玻璃化样固体,使细胞本身及冷冻溶液在冷冻时,呈现黏稠而不产生结晶的玻璃化状态,利用这种不结冰的原理以改善慢速冷冻之缺点,同时玻璃化冷冻其高浓度冷冻保护剂和细胞间经一定时间平衡後,细胞体积可因脱水而减少30-50%,然後将之置入冷冻器材,再直接投入液态氮中使细胞瞬间玻璃化,在无冰晶形成下保存,以减少细胞内结冰造成伤害。此方法设备要求低,节省人力,应用范围广,复苏存活率高。是应用较多,也是目前我院生殖中心所采用的冷冻技术。

    目前,胚胎冻存技术在辅助生殖领域得到了广泛应用,如果患者夫妇在周期治疗中获得了较多胚胎,在满足当前周期治疗的基础上,剩余的胚胎可进行冻存,作为生育力保存或在治疗失败后继续进行移植。胚胎冻存技术已常规应用于生殖医学的临床工作。国外已有报道,美国一位45岁的妇女,通过移植一枚冻存19年的胚胎,受孕并足月分娩。国内尚未见相关报道。我院生殖中心2015年曾使用一枚已冻存10年的胚胎,使一位47岁的母亲成功的怀上了“二胎”。由于我国开展体外受精-胚胎移植技术较国外时间短。且胚胎冻存技术不断更新进展。所以目前国内尚未见10年以上的冻胚移植报道。但相信随着生育二胎意愿的增多和生育力保健意识的增强,胚胎冻存技术的实施可能会越来越多,成为生育力保健的常规选择。

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